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胡椒堿（piperine）是一種生物堿，分子式C17H19NO3。存在于多種胡椒屬植物果實(shí)中，為其辛辣味成分之一，但胡椒的辛辣味主要來(lái)自它的異構(gòu)體佳味堿。在商品黑胡椒和白胡椒中，胡椒堿的含量為5％～9％，有時(shí)高達(dá)11％。無(wú)色單斜棱柱狀晶體。熔點(diǎn)130～133℃。溶于乙酸、苯、乙醇 和氯仿，微溶于乙醚。

胡椒堿是一種廣譜抗驚厥藥，對(duì)小鼠實(shí)驗(yàn)性電驚厥有良好的對(duì)抗作用，對(duì)戊四氮、印防己毒素、士的寧，以及腦室內(nèi)注射筒箭毒堿、谷氨酸等引起的驚厥發(fā)作和聽(tīng)源性發(fā)作，都有不同程度的對(duì)抗作用。胡椒堿對(duì)蠅類的毒性比除蟲(chóng)菊高。

賽智科技利用全新高性能的LC-10Tvp高效液相色譜儀，經(jīng)實(shí)踐檢測(cè)可提供食品中胡椒堿的HPLC檢測(cè)方案，得出的結(jié)果準(zhǔn)確可靠，檢出限好，適用于胡椒及胡椒制品的測(cè)定，僅供廣大用戶參考。

以下是食品中胡椒堿測(cè)定的詳細(xì)檢測(cè)方法。

1　 儀器與試劑

1.1 儀器
　　LC-10Tvp高效液相色譜儀；
　　Vertex 色譜柱　250mm×4.6mm×5μm；
　　組織搗碎機(jī)；
　　樣品篩；
　　萬(wàn)分之一天平；
　　棕色圓底燒瓶，配套冷凝回流裝置。

1.2 試劑
　　甲醇：色譜純。
　　乙醇：95%（質(zhì)量分?jǐn)?shù)）。
　　胡椒堿標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：純度大于98%。
　　胡椒堿標(biāo)準(zhǔn)溶液：準(zhǔn)確稱取10.0(精確到0.1)mg胡椒堿標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)于10mL棕色燒杯中，用乙醇溶解，轉(zhuǎn)移至10mL棕色容量瓶中，用乙醇定容至刻度。

2　 測(cè)定原理
　　試樣中的胡椒堿用乙醇提取，用高效液相色譜紫外檢測(cè)器檢測(cè)，外標(biāo)法定量。

3　 色譜條件
　　色譜柱：Vertex 色譜柱　250mm×4.6mm×5μm；          
　　流動(dòng)相：甲醇+水(77+23)；
　　流速：1 mL/min；
　　進(jìn)樣量：20μL。
　　檢測(cè)波長(zhǎng)：343nm

4　 試樣溶液的制備
　　用組織搗碎機(jī)將胡椒打碎，然后用樣品篩將打碎的樣品篩過(guò)。稱取過(guò)篩的試樣0.2-0.5克，置于圓燒瓶中，加入50ml乙醇，裝上回流冷凝管，加熱至沸，保持回流3小時(shí)，冷卻至室溫后，將溶液慮入棕色容量瓶中，用乙醇少量多次沖洗抽提瓶和過(guò)濾器，洗液一并慮入容量瓶中，并加乙醇至刻度，搖勻，經(jīng)0.45μm微孔濾膜過(guò)濾后，待液相色譜測(cè)定。

從胡椒油樹(shù)脂試樣中稱取0,05克-0.1克試料，置于100ml棕色容量瓶中，用乙醇定容至刻度，搖勻，經(jīng)0.45μm微孔濾膜過(guò)濾后，待液相色譜測(cè)定。

5　 結(jié)果分析
　　在添加0.25g/kg-5.0g/kg范圍內(nèi)，回收率在89%-106之間，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于5%。
　　色譜圖如下圖所示，其峰型較好，滿足日常檢測(cè)要求。 

胡椒堿標(biāo)準(zhǔn)色譜圖