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賽智科技推出豬血中免疫球蛋白IgG的高效液相HPLC檢測方案 

【免疫球蛋白】

免疫球蛋白:指具有抗體活性的動物蛋白。主要存在于血漿中,可溶性免疫球蛋白存在于體液中,參與體液免疫 ,也見于其他組織和一些分泌液中。人血漿內(nèi)的免疫球蛋白大多數(shù)存在于丙種球蛋白(γ-球蛋白)中。免疫球蛋白可以分為IgG、IgA、IgM、IgD、IgE五類。

 

【IgG生理作用】

人體血清免疫球蛋白IgG是初級免疫應答中最持久、最重要的抗體,它僅以單體形式存在。大多是抗菌性、抗毒性和抗病毒抗體屬于IgG,它在抗感染中起到主力軍作用,它能夠促進單核巨噬細胞的吞噬作用(調(diào)理作用),中和細菌毒素的毒性(中和毒素)和病毒抗原結(jié)合使病毒失去感染宿主細胞的能力(中和病毒)。IgG 在機體合成的年齡要晚于IgM,在出生后第3 個月開始合成,3-5 歲接近成年人水平。它是唯一能通過胎盤的Ig,在自然被動免疫中起重要作用。此外,IgG 還具有調(diào)理吞噬和結(jié)合SPA等作用。


    以下是賽智科技利用STI501高效液相色譜儀對豬血中免疫球蛋白IgG進行的HPLC檢測方案。


    (本應用方案請勿轉(zhuǎn)載,侵權(quán)必究)


1、儀器與試劑

  1.1儀器、設備

  STI501高效液相色譜儀

  蛋白柱

  分析天平

  PH計

  容量瓶

  針頭過濾器

  微孔濾膜:0.45μm

  1.2試劑

  磷酸二氫鉀(AR)

  磷酸氫二鉀(AR)


2、供試品溶液和對照品溶液的制備

對照品溶液的制備   取IgG標準品0..01g,用流動相A溶解并定容至10.0ml,搖勻,即得標準儲備液,濃度為1mg/ml;取適量該儲備液用流動相A稀釋成含IgG0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mg/ml的標準系列,臨用時配制。

供試品溶液的制備  稱取一定量的血漿蛋白粉試樣約0.1g于容量瓶中,用流動相A稀釋至25.0ml,搖勻,經(jīng)0.45um微孔濾膜過濾后進樣分析。


3、色譜條件

  色譜柱:蛋白柱

  流動相:流動相A:PH6.5,0.05mol/l磷酸鹽緩沖液

  流動相B:PH2.5,0.05mol/l甘氨酸鹽緩沖液

  梯度洗脫程序見下表

  波長:280nm

  流速:0.4mL/min

  進樣量:20ul

  溫度:室溫

梯度洗脫程序

4、測定法

  分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各20ul,注入液相色譜儀,測定,即得


5、譜圖




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